液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件，通過固定相與流動(dòng)相的相互作用差異實(shí)現(xiàn)樣品組分的分離，其性能直接影響分析的分辨率、靈敏度和效率。
液相色譜柱內(nèi)部填充有固定相(如硅膠基質(zhì)鍵合相、聚合物基質(zhì)填料等)，當(dāng)流動(dòng)相(液體溶劑)攜帶樣品通過時(shí)，樣品中各組分因與固定相的相互作用力(吸附、分配、離子交換、尺寸排阻等)不同，在色譜柱中的遷移速度產(chǎn)生差異，從而實(shí)現(xiàn)分離。
液相色譜柱的分離本質(zhì)是 “樣品中不同組分與固定相、流動(dòng)相的作用力差異”—— 作用力強(qiáng)的組分在柱內(nèi)停留時(shí)間長(保留時(shí)間長)，作用力弱的組分停留時(shí)間短(保留時(shí)間短)，實(shí)現(xiàn)組分的依次流出。
基本構(gòu)造
由耐壓材料(不銹鋼、鈦合金等)制成圓柱形壓力容器，內(nèi)部填充特定固定相(如硅膠鍵合相、聚合物基質(zhì)填料)。
分離原理基于樣品組分與固定相(吸附、分配、離子交換等)的相互作用差異，導(dǎo)致遷移速度不同。
使用前準(zhǔn)備
柱平衡：新柱或長期未使用的柱需用流動(dòng)相平衡(反相柱先用 10% 甲醇 - 水沖洗 30 柱體積，再用流動(dòng)相沖洗 20 柱體積；正相柱用正己烷 - 異丙醇沖洗)，直至基線穩(wěn)定(壓力、紫外信號(hào)無波動(dòng))。
樣品預(yù)處理：樣品需經(jīng) 0.22μm 濾膜過濾(去除顆粒雜質(zhì)，避免堵塞柱篩板)，并離心(10000rpm，5min)去除沉淀；避免進(jìn)樣含強(qiáng)酸、強(qiáng)堿(pH<2 或 pH>8，會(huì)破壞固定相鍵合層)或強(qiáng)氧化劑(如高錳酸鉀)的樣品。
使用后維護(hù)
短期維護(hù)(每日使用后)：
反相柱：用 10% 甲醇 - 水沖洗 30 柱體積(去除殘留樣品和鹽類，避免鹽析出堵塞柱)，再用純甲醇沖洗 10 柱體積(防止霉菌滋生)，后密封柱兩端；
正相柱：用正己烷 - 異丙醇(95:5)沖洗 30 柱體積，避免殘留極性組分；
離子交換柱：用空白流動(dòng)相沖洗 30 柱體積，去除殘留離子。
長期維護(hù)(超過 1 周不使用)：反相柱用純甲醇或乙腈保存，正相柱用正己烷保存，離子交換柱用含低濃度鹽的流動(dòng)相(如 0.01mol/L NaCl)保存，定期(每 2 周)更換保存液。
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