紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用功能及注意事項(xiàng)介紹

紫外-可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理，利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈.見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長(zhǎng)的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種?？梢姽鈪^(qū)的測(cè)量用玻璃吸收池，紫外光區(qū)的測(cè)量須用石英吸收池。檢測(cè)器的功能是通過(guò)光電轉(zhuǎn)換元件檢測(cè)透過(guò)光的強(qiáng)度，將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測(cè)器。分光光度計(jì)的分類方法有多種：按光路系統(tǒng)可分為單光束和雙光束分光光度計(jì)；按測(cè)量方式可分為單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)；按繪制光譜圖的檢測(cè)方式分為分光掃描檢測(cè)與二極管陣列全譜檢測(cè) 。

分光光度計(jì)的基本原理是建立在光與物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上,當(dāng)光子和某一溶液中吸收輻射的物質(zhì)分子相碰撞時(shí),就發(fā)生吸收,測(cè)量其吸光度值的大小可反映某種物質(zhì)存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關(guān)系,這就是著名的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光(單一波長(zhǎng)光)照射樣品。

為了使該定律具有良好的線性,對(duì)測(cè)量濃度有一定的范圍要求。也就是吸光度值控制在0.2～0.7之間,并且要求單色光垂直照射樣品,試樣要均勻。一臺(tái)性能優(yōu)良的分光光度計(jì),必須有一個(gè)高性能的光路系統(tǒng)即單色儀。單色儀有兩類:一類是以玻璃三棱鏡為色散元件組成;另一類是由光柵為色散元件組成。兩種單色儀各有利弊,用石英玻璃做成的單色儀,在紫外光區(qū)有較高的色散率,波長(zhǎng)精度較高,分辨率可達(dá)0.2nm,但在可見光區(qū)要大于2nm,波長(zhǎng)精度不線性,像751G型分光光度計(jì),是由光柵做成的單色儀,在全段波長(zhǎng)(200nm～800nm)之間具有相同的波長(zhǎng)精度。但目前大部分光柵或分光光度計(jì)所用的光柵都是復(fù)制光柵,波長(zhǎng)精度不太高,如754、722、752型分光光度計(jì),波長(zhǎng)精度在±2nm。

紫外分光光度計(jì)的工作波長(zhǎng)在200～1000nm之間，其波長(zhǎng)范圍涵蓋紫外光（200～400nm）、可見光（400～750nm）及近紅外光（750～1000nm）。在紫外光區(qū)（200～350nm）測(cè)定時(shí)必須用石英杯。

注意事項(xiàng)

1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過(guò)程中禁止打開樣品室蓋。

2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過(guò)滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿。

3.測(cè)定時(shí)，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時(shí)清理干凈。

4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開。